定量菌株的使用主要包括溶解菌株、接种培养二个核心步骤。操作需严格遵循无菌规范以确保结果准确性。
使用步骤
定量菌株的使用需根据实验目的选择合适方法,以下是两种常见操作流程,均需在无菌环境下进行:
1. 若接种方法为平板涂布法(以杭州百达悦晟的定量菌株E2系列为例):
① 使用前将未开启的西林瓶平衡至室温。
② 将1mL复溶液加入西林瓶中,盖上瓶盖,静置约2分钟,涡旋震荡约30秒。
③ 吸取100μL溶液(含量约为10~100cfu),加至已凝固的无菌培养基平皿中,再用无菌涂布棒将菌液涂抹均匀,待菌液渗透入培养基内,将平皿倒置,置于所需温度培养即可。
2. 若接种方法为液体接种法(以杭州百达悦晟的定量菌株E2系列为例):
① 使用前将未开启的西林瓶平衡至室温。
② 将1mL复溶液加入西林瓶中,盖上瓶盖,静置约2分钟,涡旋震荡约30秒。
③ 吸取1mL已溶解完全的菌液,加入9mL无菌生理盐水中,混匀。
④ 吸取步骤③中1mL溶液(含量为10~100cfu),加至相应液体培养基或供试品中,置于所需温度培养即可。
3. 或按照相应试验要求,进行相应接种培养即可。
4.菌种计数培养的条件:胰酪大豆胨琼脂培养基平板在30~35℃培养1~3天,沙氏葡萄糖琼脂培养基平板在20~25℃培养2~5天。
注:生孢梭菌、痤疮丙酸杆菌等厌氧菌需在厌氧环境中培养。
操作图如下:

注意事项
为确保实验可靠性和菌株有效性,需关注以下要点:
1.要求无菌操作:所有步骤需在生物安全柜中进行,避免污染;工具(如移液器、涂布棒)需灭菌。
2.菌株管理:定量菌株为商业派生菌株,溶解后应在2小时内使用;若保存在2~8℃,可在24小时内使用。不可再传代使用。
3.保存处理:在废弃本产品之前须经高温121℃灭菌处理20分钟。